４）ICSI 手技と胚培養
・精子の選別、不動化、インジェクションピペット内への充填は ICSI 群では PVP を PICSI 群
では SpermSlowTM を使用する。
・ICS 群の精子選別は、PVP の上端まで泳ぎ上がった中で形態の良好な精子を培養士が目で見
て行う。
・PICSI 群の精子選別は、SpermSlowTM と Gamete Buffer のドロップの境界でヒアルロン酸の
3 次元ネット構造に捕まり限りなくゆっくり動いている精子を選んでいく。
・精子の注入を終えた卵子は、single step medium を使用し 30μℓでドロップ培養を行う。
５）胚凍結と胚移植
・培養 5 日目から 6 日目に胚盤胞になった胚を vitrification 法で凍結保存する。
・胚移植は原則として凍結融解単一胚移植にて行い、移植の際はグレードの高い胚盤胞から優先
的に移植し両群に偏りが生じないように注意して行う。
6）評価項目と評価タイミング
・評価する項目と評価するタイミングは以下の通り行う。
① Day1
正常受精の確認。雌性前核と雄性前核の両方が確認できた胚(2PN 胚)を正常受精卵と判断する。
受精率は、正常受精卵数/MⅡ卵子数×100 (%)で算出する。
②

Day3

形態評価によりグレード 1 胚率を求める。Veeck の分類に基づき Day3 における胚の分割速度も
考慮し、割球の数は 6 細胞以上、割球の大きさが均等で fragment の無い胚をグレード 1 胚とす
る。グレード 1 胚率は、グレード 1 胚数/正常受精卵数×100 (%)で算出する。
③ Day5
Gardner の分類に基づき、胚盤胞の形態評価を行う。3BB 以上の胚盤胞へ発生した割合を求め
る。胚盤胞到達率は、3BB 以上の胚盤胞数/継続培養数×100 (%)で算出する。
④ 妊娠率と流産率
移植後 14 日目前後の血中ｈCG 濃度が陽性で、移植から 6～8 週の時点で胎嚢(GS)が確認できた
時点で臨床的妊娠と判断し、妊娠率を求める。妊娠率は、臨床的妊娠数/移植数×100 (%)で算出
する。臨床的妊娠後、流産が起きた場合は流産率として記録する。流産率は、流産数/臨床的妊娠
数×100 (%)で算出する。
⑤HBA スコア
R Assay を用いて HBA スコアを求め
処理後の精子を ICSI または PICSI に使用する前に HBA○

る。HBA スコアは合計で 200 個の精子をカウントし、ヒアルロン酸に結合した運動精子/ヒアル
ロン酸に結合した運動精子+ヒアルロン酸に結合していない運動精子×100(%)で算出する。
（効果）
ICSI 後に反復流産や着床不全を経験した患者を対象に、ICSI 群と PICSI 群の成績を前方視的
かつ無作為に比較することで PICSI が胚発育能を向上させ流産率を低下させるために有効であ
るのかを示すことができるようになる。それによって、ICSI 後に反復流産や着床不全を経験し
た患者に次回採卵時の治療選択として PICSI の情報を提供することが可能となる。奇形精子患
者においても、射出精子の中に含まれている成熟精子を PICSI で選別し卵子に注入することが
可能となり、結果的に流産率の減少が期待できるようになると考えられる。

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