14 一般試験法 2.28 円偏光二色性測定法

第十八改正日本薬局方第一追補

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波数分解能の高いフーリエ変換分光光度計では1368.6 nm

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成分に特徴的な波長(又は波数)でのピーク高さをモニタリング

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cm-1)の水蒸気の吸収ピークを用いることができる．

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の指標とすることにより，原薬又は製剤の製造工程管理に利用

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することもできる．
5.2. 定量分析

3

(7306.7

なお，妥当性が確認できれば，ほかの物質を基準として用い

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ることもできる．

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5

4.2. 分光学的直線性

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定量分析は，通例，試料群のスペクトルと既存の確立された

6

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分析法によって求められた分析値との関係から，ケモメトリッ

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doped polymer standards)など適当な標準板を用いて分光学的

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クスの手法を用いて，定量モデルを求め，換算方程式によって，

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直線性の評価を行うことができる．ただし，直線性の確認のた

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測定試料中の各成分濃度や物性値を算出する．定量モデルを求

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めには，反射率10 〜 90％の範囲内の少なくとも4濃度レベル

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めるためのケモメトリックスの手法には，重回帰分析法及び

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の標準板を用いる必要がある．また，吸光度1.0以上での測定

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PLS (Partial least squares)回帰分析法などがある．

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が想定される場合，反射率2％又は5％の標準板のいずれか又

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は両標準板を追加する必要がある．

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いて，ある特定波長(又は波数)における吸光度又はこれに比例

異なる濃度で炭素を含浸させた板状のポリマー(Carbon-

試料の組成が単純な場合，濃度既知の検量線作成用試料を用

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これらの標準板につき，波長1200 nm (8300 cm-1)，1600

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するパラメーターと濃度との関係をプロットして検量線とし，

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nm (6250 cm-1)及び2000 nm (5000 cm-1)付近の位置における

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これを用いて試料中の分析対象成分の濃度を算出できることも

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吸光度を測定し，この値をそれぞれの標準板に付与されている

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ある(検量線法)．

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各波長(又は波数)での吸光度に対してプロットするとき，得ら

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れる直線の勾配は，通例，1.00±0.05 ，縦軸切片は0.00±

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0.05の範囲内にあることを確認する．ただし，適用する用途に

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2.28

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応じて，適切な許容差を設定することができる．

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5. 定性又は定量分析への応用

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近赤外吸収スペクトルの解析法としては，通常，ケモメトリ

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ックスの手法を用いて解析を行うが，検量線法などの一般的な

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分光学的手法が適用可能であればこれを用いてもよい．ケモメ

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トリックスは，通例，化学データを数量化し，情報化するため

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の数学的手法及び統計学的手法を指すが，近赤外吸収スペクト

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ル測定法におけるケモメトリックスとしては，種々の多変量解

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析法が用いられ，目的に合わせて選択する．また，ケモメトリ

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ックスの手法を用いて分析法を確立しようとする場合，近赤外

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吸収スペクトルの特徴を強調すること及びスペクトルの複雑さ

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や吸収バンドの重なりの影響を減ずるために，スペクトルの一

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次若しくは二次微分処理又は正規化(Normalization)などの数

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学的前処理を行うことは，重要な手順の一つとなる．

円偏光二色性測定法

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円偏光二色性測定法は，光学活性な化合物の光の吸収波長領

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域において，左右円偏光の吸収度合いが異なる現象(円偏光二

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色性)を利用して，光学活性物質の構造解析，構造確認，鏡像

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異性体やジアステレオマーとの識別などに用いられる方法であ

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る．

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本法では，円偏光二色性は，以下のように左右円偏光の吸光

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度の差として実測される．

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ΔA ＝ A L − A R

78

ΔA＝左右円偏光の吸光度の差

79

AL＝左円偏光に対する吸光度

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AR＝右円偏光に対する吸光度

81

また，左右円偏光に対するモル吸光係数の差をモル円二色性

33

近赤外吸収スペクトル測定法では，確立された後の分析法の

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性能を維持管理することが重要であり，継続的かつ計画的な保

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守点検作業が必要とされる．また，製造工程又は原料などの変

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更及び装置の主要部品の交換などに伴う変更管理又は再バリデ

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ーションの実施などに関する適切な評価手順が用意されている

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∆ɛ
＝モル円二色性[(mol/L)-1・cm-1]

38

か留意が必要である．

85

ɛ
L＝左円偏光に対するモル吸光係数[(mol/L)-1・cm-1]

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5.1. 定性分析

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ɛ
R＝右円偏光に対するモル吸光係数[(mol/L)-1・cm-1]
ｃ＝溶液中の光学活性物質の濃度(mol/L)

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として以下のように表すことができる．

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∆ɛ
＝ɛ
L− ɛ
R ＝

∆A
c×l

40

分析対象となる各物質について，許容される範囲のロット間

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変動を含んだリファレンスライブラリーを作成し，ケモメトリ

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ｌ＝層長(cm)

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ックスの手法を用いて分析法を確立した後，定性的評価を行う．

89

さらに，以下の単位も円偏光二色性を示す単位として使用す

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標準スペクトルとの比較やバリデートされたケモメトリックス

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ることができる．

44

ソフトウェアなどを用いた方法により，同一性を確認すること

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ができる．また，吸収バンドによる同定を行うこともできる．

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異方性因子(g factor)：

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∆ɛ
g＝
ɛ

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なお，多変量解析法としては波長相関法，残差平方和法，距

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離平方和法などの波長(又は波数)又は吸光度などを変数とする

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直接的な解析法のほか，主成分分析などの前処理をした後に適

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用される因子分析法，クラスター分析法，判別分析法及び

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SIMCA (Soft independent modeling of class analogy)などの

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多変量解析法もある．

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また，近赤外吸収スペクトル全体を一つのパターンとみなし， 96
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多変量解析法の適用により得られるパラメーター又は分析対象

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ɛ
＝モル吸光係数
モル楕円率 molar ellipticity：
装置によっては楕円率(° )を単位として円偏光二色性を表す．
そのような場合は，モル楕円率[θ]は以下の式を用いて計算さ
れる．

日本薬局方の医薬品の適否は，その医薬品各条の規定，通則，生薬総則，製剤総則及び一般試験法の規定によって判定する．(通則5参照 )