2 一般試験法 2.00 クロマトグラフィー総論

第十八改正日本薬局方第一追補

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tG = あらかじめ決めたグラジエント時間(20分)

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Hp ＝ マイナーピークの基線からの高さ

2

F = 流量(mL/分)

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Hv ＝ マイナーピークとメジャーピークの分離曲線の最下点

3

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(ピークの谷)の基線からの高さ

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理論段高さ(H)(同義語：理論段相当高さ(HETP))

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4
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図2.00−2

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注：適用可能なところでは，この測定の試料注入部にはオート

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サンプラーが用いられ，そのときグラジエント遅延容量には

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インジェクションループの容量も含まれる．

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L
H＝N

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理論段数(N)

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カラム性能(カラム効率)を示す数値．用いる技術によるもの

42

の，恒温，イソクラティック，又は等密度の条件下で得られた

43

データによってのみ，次式により理論段数として求めることが

44

できる．ここで，tRとwhは同じ単位で表される．

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tR 2
N ＝ 5.54 w
h

カラムに保持されない成分の溶出に必要な時間(図2.00−1で
ベースラインの目盛りは分又は秒)．
サイズ排除クロマトグラフィーでは，カラムに保持されない
成分の保持時間(t0)という．
ホールドアップボリューム(VM)

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tR ＝ 被検成分のピークの保持時間

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wh ＝ ピーク高さの中点におけるピーク幅(h／2)

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動相，保持時間によっても変化する．
換算理論段高さ(h)

カラムに保持されない成分の溶出に必要な移動相の液量．

50

VM は次式により，ホールドアップタイムとmL/分で表され

51

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た流量(F)から計算する．

18

VM ＝ tM × F

21

サイズ排除クロマトグラフィーでは，カラムに保持されない

理論段数は，被検成分はもちろん，カラム，カラム温度，移

49

16

20

( )

ホールドアップタイム(tM)

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19

カラムの長さ(L)(μm)と理論段数(N)の比．

理論段高さ(H)(μm)と粒子径(dp)(μm)の比．

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H
h＝d

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相対保持比(Rrel)

p

成分の保持容量(V0)という．

54

相対保持比は，薄層クロマトグラフィーで用いられており，

ピーク

55

標準成分の移動距離に対する被検成分の移動距離の比として求

22

単一成分(又は，二つ若しくはそれ以上の分離されない成分)

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められる(図2.00−4)．

23

がカラムから溶出されたときに，検出器の応答を記録したクロ

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57

Rrel = b／c

マトグラムの一部分．

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58

a ＝ 移動相の移動距離

て表される．

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b ＝ 被検成分の移動距離

ピークバレー比(p／v)

60

c ＝ 標準成分の移動距離

ピークレスポンスは，ピーク面積又はピーク高さ(h)によっ

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ピークバレー比は，二つのピークのベースライン分離が達成

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されないとき，システム適合性の適合要件の一つとして利用さ

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れる(図2.00−3)．

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図2.00−4
保持比(r)
保持比は，次式により概算する．

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図2.00−3

Hp
p／v ＝ H
v

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r＝

tRi − tM
tRst − tM

tRi ＝ 被検成分ピークの保持時間

日本薬局方の医薬品の適否は，その医薬品各条の規定，通則，生薬総則，製剤総則及び一般試験法の規定によって判定する．(通則5参照 )